铁皮石斛成分检测（药用铁皮石斛质量评价）

药用铁皮石斛质量评价

1 铁皮石斛化学成分及药理活性

铁皮石斛化学成分及药理活性是目前石斛领域研究的热点与重点。国内外进行了大量的研究，先后从石斛中分离鉴定出多糖类、生物碱类、菲类和联苄类等化合物，并进行了相关药理研究。研究表明： 铁皮石斛中具有抗肿瘤作用和增强免疫力作用的有效活性成分是含量较高的多糖类成分。王世林等将铁皮石斛样品分离纯化发现3类多糖，鉴定它们是一类O-乙酰葡萄甘露聚糖。杨虹等应用甲基化分析、糖组成分析和NMR等方法对铁皮石斛多糖DT2和DT3的化学结构进行研究，主要以α-(1 →4)-D-Glc为主链。2010版药典将多糖及其衍生物甘露糖含量列入定量检测指标。

石斛属植物中最先进行分离并确认结构的化合物是生物碱类成分。20世纪30年代，铃木秀干第一次提取并分离出石斛碱(Dendrobin)。但至今铁皮石斛的小分子化学成分还不清楚，其总生物碱的含量为0.02%。陈晓梅等通过对比金钗石斛和铁皮石斛的化学成分，发现都具有10个相同成分的生物碱类，但铁皮石斛的生物碱类成分含量及数量都低于金钗石斛，显示生物碱类成分不是铁皮石斛的主要成分而是金钗石斛的主要成分，如果只依据所含的相同化学成分，铁皮石斛的质量又优于金钗石斛。

石斛属植物中另一主要有效成分是游离氨基酸。铁皮石斛的主要氨基酸包括谷氨酸、亮氨酸、缬氨酸、甘氨酸和天冬氨酸，这五种氨基酸是总氨基酸的 53%。吴庆生等曾研究铜皮石斛、霍山石斛和铁皮石斛这三种安徽霍山产的石斛中的游离氨基酸通过定量分析发现这些石斛中均含有人体必不可少的 7 类氨基酸。

铁皮石斛植物中还有许多微量元素与其它成分。吴庆生等测定铜皮石斛、霍山石斛和铁皮石斛这三种安徽霍山产的石斛的微量元素，研究发现，这些石斛中Mg、Ca和K含量均较高，P含量均较低，这三类石斛几乎都含有人体所有的必需元素，其中Fe 、Zn、Mn、Cu和Sr的含量较高。铁皮石斛中还含有其他石斛没有的菲类化合物即鼓槌菲(chrysotoxene)和毛兰素(erianin)，这两种化合物是抗肿瘤的有效成分。

2 主要活性成分定量分析

在多糖、生物碱的含量测定方面，华允芬等对细茎石斛、细叶石斛和铁皮石斛的多糖成分进行了比较研究，分析证实 3 种石斛在多糖质量分数、分布、组成及分子相对质量大小上具有明显差异。李亚芳等对金钗石斛和铁皮石斛中的总生物碱和总多糖进行了含量测定，认为生物碱和多糖的功效各有侧重点，将总生物碱和多糖作为质量指标都有一定的科学性。徐程等测定了 8 种不同地域铁皮石斛的株高、茎粗、

叶面积和叶长宽比等农艺性状及其含水量、总多糖、水溶性多糖和纤维素含量，发现存在农艺性状的地域差异，其中雁荡品种和云南品种株形中等，茎较粗，多糖含量较高，适于浙江省推广。余天华等对野生及人工栽培铁皮石斛主要次生代谢物进行了对比研究，发现野生及人工栽培铁皮石斛中多糖和生物碱的含量有一定的差异，从现在及长远的市场需求来看，人工栽培铁皮石斛具有很好的前景，并可逐渐取代野生铁皮石斛的地位。丁亚平等对安徽省霍山县产的三种石斛不同生长期的不同部位中总生物碱含量进行了测定，发现总生物碱含量与石斛种类、生长期和生长部位有关。

在酚类成分的含量测定方面，马国祥等采用反相高效液相色谱法测定 18 种石斛类生药中鼓槌菲、毛兰素及 chrysotoxine 的含量，结果表明铁皮石斛中含有鼓槌菲和毛兰素，没有chrysotoxine。夏克中等采用高效液相法对鼓槌石斛中抗癌活性成分毛兰素的含量进行测定，该方法准确，重现性好，可作为鼓槌石斛药材的质控方法。杨虹等对不同采收期鼓槌石斛中酚类化合物进行测定，结果表明酚类化合物在春季 2～4 月量最低，秋冬季量相对较高。

3 石斛属植物指纹图谱

在化学指纹图谱方面，殷放宙等建立了云南铁皮石斛药材的 RP-HPLC 指纹图谱，该指纹图谱检测方便，重现性好，可作为铁皮石斛药材质量控制的重要方法。王源园等采用 HPLC/UV 和 HPLC/MS 技术研究马鞭石斛和密花石斛茎、根、苗等不同部位的色谱指纹图谱，从而建立了两类石斛不同部位的指纹图谱。张尊建等建立了 5种石斛的 HPLC/UV 指纹图谱，并对其中 3 种石斛 HPLC/MS 指纹图谱中的色谱峰进行了解析。目前，尚没有从多糖的结构或多糖的指纹图谱方面对石斛属植物进行鉴别的报道。

4《药典》、《炮规》与地方标准对药材质量安全的要求

铁皮石斛单独收载于 2010 年版《中国药典》。与 2005 年版的《中国药典》相比，不仅有显微特征、外观性状等质量标准的检查项目，还增加了水分、总灰分、浸出物、多糖及甘露糖的含量测定等质量标准检查项目。《无公害铁皮石斛》（DB33/T 635.4-2007）以粗多糖为定量指标（表 ）。

表 2010 年版《药典》与 2005 年《炮规》中质量控制标准

铁皮石斛种质资源收集与评价已经引起了相关科研院所及企业地重视，显微鉴定、DNA 分子标记技术领域也取得了一定进展，为遗传多样性与真伪鉴别提供了依据，但种质资源（药材样品）收集大多只重视物种（分类学上的种）与当地种质，由于该属植物主要依靠昆虫传播花粉，并能种间自然杂交，同时较小的形态及组织构造上的差异，属内、种内分化复杂而多样，传统鉴别技术标准难以量化，鉴定种质与样品非常困难；由于药材样品不全和技术水平有限，DNA 分子标记技术只停留在研究真伪上，还没有建立可靠、公认的真伪与优劣鉴别体系；铁皮石斛质量评价多停留在总多糖指标上，许多学者的研究结果表明，很多非铁皮石斛药材多糖含量比铁皮石斛要高得多，因此将总多糖指标作为质量评价标准来鉴别真伪与优劣不够科学全面。目前铁皮石斛的重金属和农药残留限量指标只是笼统地参照食品的标准，其药材、制剂与饮片的质量控制实际上处于无标状态；对采收期“全年可采”等质量控制关键环节描述不够科学，产地加工与炮制方面涉及更少。因此，开展铁皮石斛生产质量安全过程控制技术与质量安全评价技术研究，开展主要活性成分定量分析、植物指纹图谱，品种、药材与产品真伪鉴别、重金属、农残限量指标等综合质量安全评价研究，明确铁皮石斛成分和药效，建立产前、产中和产后全程质量安全控制技术与标准体系，对于规范市场，扩大消费群体、重塑消费者信心及促进铁皮石斛产业发展都具有非常重要的作用。